食品微生物實(shí)驗(yàn)室的無(wú)菌間應(yīng)制定質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)，并設(shè)專人負(fù)責(zé)無(wú)菌間的定期環(huán)境監(jiān)測(cè)工作。對(duì)無(wú)菌室的管理可遵循以下的原則：
1. 無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間，無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。
2. 工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。
3. 無(wú)菌室使用前必須打開無(wú)菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上，并且同時(shí)打開超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作人員進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)關(guān)掉紫外燈；
4. 人員進(jìn)入無(wú)菌室要穿無(wú)菌衣、帽、口罩和專用鞋，非工作人員不得隨意進(jìn)入；
5. 無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液等。
6. 無(wú)菌室內(nèi)配備紫外燈進(jìn)行空氣消毒，應(yīng)定期用適宜的消毒液（70%酒精或0.2%新潔爾滅）滅菌清潔，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。
7. 無(wú)菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。每日進(jìn)行濕式小掃除，每周進(jìn)行大掃除，每月進(jìn)行空氣和實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的細(xì)菌學(xué)檢測(cè)，各項(xiàng)指標(biāo)控制在**低標(biāo)準(zhǔn)，符合無(wú)菌室的技術(shù)要求。
8. 嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染，已污染者應(yīng)停止使用。
9. 需要帶入無(wú)菌室使用的儀器、器械、平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)用適宜的方法滅菌。
10. 供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用70％的酒精棉消毒外表面。
11. 無(wú)菌間內(nèi)應(yīng)保持清潔。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室，用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作臺(tái)面，不得存放與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品。再用紫外燈輻照滅菌。需30W紫外燈，距離在1.0m處，照射時(shí)間不少于30min，使用紫外燈，應(yīng)注意不得直接在紫外線下操作，以免引起損傷，燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭，除去上面灰塵和油垢，以減少紫外線穿透的影響。
12. 處理和接種食品標(biāo)本時(shí)，進(jìn)入無(wú)菌間操作，不得隨意出入，如需要傳遞物品，可通過小窗傳遞。
13. 無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺(tái)開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌培養(yǎng)皿若干，無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻**約45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ml，放**凝固后，倒置于30～36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，證明無(wú)菌后，取平板3～5個(gè)，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30分鐘后，倒置于30～36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個(gè)菌落，10000級(jí)潔凈室平均不得超過3個(gè)菌落。如超過限度，應(yīng)對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行徹底消毒，直**重復(fù)檢查合乎要求為止。
無(wú)菌操作基本技術(shù)及要求
1. 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%的酒精擦拭無(wú)菌操作抬面，并開啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。
2. 每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以70%的酒精擦拭無(wú)菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。
3. .無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%的酒精擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之中央無(wú)菌區(qū)域，勿在邊緣的非無(wú)菌區(qū)域操作。
4. 小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
5. 工作人員應(yīng)注意自身之安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來(lái)自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)之無(wú)菌操作臺(tái)(**少ClassII)。操作過程中，應(yīng)避免引起氣溶膠類物質(zhì)的產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等。
6. 使用無(wú)菌瓶?jī)?nèi)的溶液時(shí)，不可將無(wú)菌敷料堵塞瓶口傾倒無(wú)菌溶液，或直接伸入溶液瓶?jī)?nèi)蘸取，以免污染剩余的溶液。
7. 無(wú)菌包內(nèi)物品不慎污染或無(wú)菌包浸濕，外界微生物可滲入包內(nèi)，造成污染，需重新消毒。
8. 戴手套時(shí)應(yīng)注意未戴手套的手不可觸及手套外面，而戴手套的手則不可觸及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如發(fā)現(xiàn)破裂，應(yīng)立即更換。脫手套時(shí)，須將手套口翻轉(zhuǎn)膠下，不可用力強(qiáng)拉手套邊緣或手指部分，以免損壞。
9. 每次操作過程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。
10. 吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。
11. 接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。
12. 帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒，24小時(shí)后取出沖洗。
13. 如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3％的來(lái)蘇爾傾覆在被污染處**少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí)，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。
14. 凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#